山東大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院導(dǎo)師：孔健 正文

　　孔健 教授
　　博士生導(dǎo)師
　　電話：0531－88364384轉(zhuǎn)8401
　　E-mail:kongjian@sdu.edu.cn
　　
　　教育背景
　　孔健，女，1964年7月生，博士，教授，2003年被評(píng)為博士生導(dǎo)師。兼任山東省食品工業(yè)協(xié)會(huì)理事。
　　主要從事乳酸菌及其分子生物學(xué)研究。近五年承擔(dān)國(guó)家自然基金2項(xiàng)，國(guó)家863課題2項(xiàng)、省部級(jí)重大科研課題6項(xiàng)。公開(kāi)發(fā)表學(xué)術(shù)論文50余篇；主編了《農(nóng)業(yè)微生物技術(shù)》，參編了《益生乳酸細(xì)菌》、《微生物學(xué)》、《微生物分子育種原理和技術(shù)》。曾獲山東省第四屆青年科技獎(jiǎng)和山東大學(xué)“開(kāi)拓未來(lái)”獎(jiǎng)，獲省部級(jí)科技進(jìn)步獎(jiǎng)一等獎(jiǎng)1項(xiàng)、二等獎(jiǎng)2項(xiàng)。承擔(dān)微生物學(xué)專業(yè)方向的教學(xué)任務(wù)，主講了“微生物學(xué)”、“微生物生理學(xué)”、“基因工程原理”、“微生物代謝調(diào)控”及“分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)”等多門(mén)本科生和研究生主干課程。
　　
　　學(xué)習(xí)經(jīng)歷
　　1982年9月~1986年7月，山東大學(xué)微生物學(xué)專業(yè)，獲理學(xué)學(xué)士；
　　1988年9月~1992年6月，山東大學(xué)微生物學(xué)專業(yè)，獲理學(xué)碩士；
　　1997年9月~2001年6月，山東大學(xué)微生物學(xué)專業(yè)，獲理學(xué)博士；
　　1999年4月~2000年7月，赴丹麥皇家畜牧和農(nóng)業(yè)大學(xué)乳制品和食品科學(xué)系訪問(wèn)學(xué)者，主要從事乳酸菌的分子生物學(xué)研究。
　　
　　工作經(jīng)歷
　　1986年7月~1992年8月，山東大學(xué)微生物學(xué)系，助教；
　　1992年9月~1997年8月，山東大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，講師；
　　1997年9月~2002年8月，山東大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，微生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，副教授；
　　2002年9月~今，山東大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，微生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，教授。
　　2009年擬招收博士研究生1－2名，博士生畢業(yè)后能夠勝任高校教師、科研單位研究人員以及食品發(fā)酵行業(yè)的高級(jí)研發(fā)技術(shù)人才等工作。
　　
　　研究方向
　　研究領(lǐng)域：食品微生物
　　主要研究方向：乳酸菌及其應(yīng)用的關(guān)鍵技術(shù)研究
　　乳酸菌是一類重要工業(yè)微生物，在食品發(fā)酵、生物制藥、畜牧養(yǎng)殖等方面廣泛應(yīng)用，是公認(rèn)的安全（generally recognized as safe, GRAS）菌株。傳統(tǒng)的優(yōu)良發(fā)酵菌株均來(lái)源于自然篩選和誘變選育，自80年代初建立乳酸菌分子生物學(xué)后，分子定向育種成為直接獲取優(yōu)良菌株的有效手段。乳酸菌的應(yīng)用領(lǐng)域又傳統(tǒng)發(fā)酵迅速拓展到其它領(lǐng)域。本課題組就開(kāi)辟乳酸菌新應(yīng)用領(lǐng)域中急需解決的關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題進(jìn)行基礎(chǔ)研究，以便乳酸菌更好地服務(wù)于人類。
　　1、乳酸菌食品級(jí)載體的構(gòu)建：自80年代建立乳酸菌分子生物學(xué)以來(lái)，已構(gòu)建了很多有工業(yè)應(yīng)用價(jià)值的重組乳酸菌，但是這類工程菌株一直沒(méi)能投入生產(chǎn)，其主要原因在于這種重組菌經(jīng)過(guò)了遺傳修飾，存在安全隱患如攜帶抗生素抗性標(biāo)記等。目前課題組通過(guò)篩選食品級(jí)選擇標(biāo)記、理性設(shè)計(jì)高效啟動(dòng)子、信號(hào)肽等結(jié)構(gòu)元件，建立細(xì)胞外和細(xì)胞表面靶向分泌的食品級(jí)系統(tǒng)，旨在保證重組菌在工業(yè)發(fā)酵、食品加工以及穿過(guò)腸道等環(huán)節(jié)的安全，盡早實(shí)現(xiàn)重組菌的潛在應(yīng)用價(jià)值。
　　2、功能蛋白的定向表達(dá)：乳酸菌是腸道正常有益菌群，以乳酸菌為載體將治療性蛋白或抗原傳遞至腸道粘膜表面，繼而誘導(dǎo)粘膜免疫和系統(tǒng)免疫成為乳酸菌新功能開(kāi)發(fā)的一個(gè)重要方向，但是目前乳酸菌表達(dá)的抗原多以分泌或胞內(nèi)形式產(chǎn)生，致使免疫強(qiáng)度低，這是乳酸菌活載體疫苗存在的主要問(wèn)題。課題組利用細(xì)胞壁錨定結(jié)構(gòu)域，將其連接與外源蛋白的C-端，構(gòu)建了細(xì)胞表面靶向表達(dá)載體，使表達(dá)的外源蛋白在分泌過(guò)程中穿過(guò)細(xì)胞膜以共價(jià)鍵結(jié)合到細(xì)胞壁的肽聚糖上，實(shí)現(xiàn)了抗原蛋白、乳糖酶等功能蛋白在乳酸菌細(xì)胞表面的靶向表達(dá)；同時(shí)，課題組還以綠色熒光蛋白為報(bào)告基因，借助于細(xì)胞壁蛋白橋，在體外建立了乳酸菌表面展示系統(tǒng)，為乳酸菌作為載體疫苗的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。
　　3、益生菌遺傳操作載體的構(gòu)建與功能開(kāi)發(fā)：傳統(tǒng)的益生菌主要包括乳桿菌、雙歧桿菌等乳酸菌種類, 被廣泛用于酸奶、干酪、發(fā)酵肉制品等產(chǎn)品中,目前益生菌的分子操作工具還很不完善。課題組對(duì)分離自干酪乳桿菌中一隱蔽性質(zhì)粒進(jìn)行改造，獲得寬宿主的乳桿菌表達(dá)載體，將功能性蛋白如過(guò)氧化氫酶、乙醛脫氫酶、脂肪酸脫氫酶等導(dǎo)入酸奶發(fā)酵劑中，以提高發(fā)酵劑的抗氧化性、風(fēng)味和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。目前還對(duì)乳酸菌的代謝工程進(jìn)行了初步研究。
　　4、乳酸菌及其活性物質(zhì)：篩選到一批性能優(yōu)良的乳酸菌菌株、研制出具有應(yīng)用潛能的微生態(tài)制劑、青貯劑、益生菌劑等。重點(diǎn)對(duì)乳球菌產(chǎn)生的乳鏈菌素及其它抗菌肽的制備和應(yīng)用進(jìn)行了研究。
　　5、乳酸菌噬菌體的生態(tài)分布及其抗性噬菌體菌株的構(gòu)建：對(duì)發(fā)酵乳制品過(guò)程中存在污染發(fā)酵劑的噬菌體進(jìn)行生態(tài)調(diào)查和分離，并構(gòu)建抗噬菌體工業(yè)發(fā)酵菌株。
　　
　　承擔(dān)課題
　　近五年承擔(dān)的部分科研課題：
　　1． 乳酸菌食品級(jí)安全載體構(gòu)建的技術(shù)，國(guó)家863課題，批準(zhǔn)號(hào)：2006AA10Z321(2006-2010)，50萬(wàn)元.
　　2．高活性乳酸菌發(fā)酵劑制造的關(guān)鍵技術(shù)。國(guó)家863課題，批準(zhǔn)號(hào)：2006AA10Z344(2006-2009)，40萬(wàn)元.
　　3．益生菌定向篩選與功能開(kāi)發(fā)關(guān)鍵技術(shù)。國(guó)家863課題，批準(zhǔn)號(hào)：2008AA10Z335(2007-2010)，30萬(wàn)元.
　　4．豬圓環(huán)病毒活疫苗載體的構(gòu)建及免疫分析，國(guó)家自然科學(xué)基金，批準(zhǔn)號(hào)30570043(2006.1~2008.12)，26萬(wàn)元.
　　5．綠色巴夫藻脂肪酸去飽和酶基因的克隆及表達(dá)，國(guó)家自然科學(xué)基金，批準(zhǔn)號(hào)30370035(2004.1~2006.12)，20萬(wàn)元.
　　6．纖維素酶和木聚糖酶基因在乳酸菌中的表達(dá)，教育部留學(xué)回國(guó)基金，2002.1~2004.12.
　　
　　研究成果及發(fā)表論文
　　科研成果：
　　近五年，在國(guó)際SCI期刊發(fā)表文章5余篇，國(guó)內(nèi)核心期刊10余篇。申請(qǐng)發(fā)明專利2項(xiàng)。
　　代表性學(xué)術(shù)論文 (* 通訊作者Corresponding author):
　　1.Wang K, Kong J* et al., Expression of the capsid protein of Porcine Circovirus Type 2 in Lactococcus lactis for oral vaccination. Journal of Virological Methods. 2008, 150：1-6.
　　2.Niu Y, Kong J*, Longyun Fu. Identification of a novel C20-elongase gene from the marine algae Pavlova viridis and its overexpression in Escherichia coli. Marine Biotechnology, 2008, (Accepted).
　　3.Niu Y, Kong J*, Xu Y. A novel GFP-fused eukarytic membrane protein expression system in　Lactococcus lactis and its application to overexpression of an elongase. Current Microbiology,2008,(Accepted)
　　4.Shaohua Wang, Jian Kong* and Xiuhong Zhang. Identification and characterization of the two-component cell lysis cassette encoded by temperate bacteriophage φPYB5 of Lactobacillus fermentum. Journal of Applied Microbiology, 2008, (Accepted)
　　5.Zhang XH, Kong J*, Qu Y. Isolation and characterization of a Lactobacillus fermentum temperate bacteriophage from Chinese yogurt. Journal of Applied Microbiology, 2006, 101：857–863.
　　6.Kong Jian,Jytte Josephsen. The role of the plasmid-encoded R/M system LlaBIII in protecting Lactococcus lactis against bacteriophages. Letter in Applied Microbiology, 2002,34,249-253.
　　7.孔健, Jytte Josephsen, 馬桂榮.限制和修飾系統(tǒng)LlaBIII在構(gòu)建抗噬菌體菌株中的作用. 微生物學(xué)報(bào),2002, 42(2)：246-249.
　　8.孔健, Jytte Josephsen,馬桂榮. 限制和修飾酶基因LlaBIII的克隆及分析. 生物工程學(xué)報(bào),2001, 17(6)：663-668.
　　9.孔健，莊緒亮，馬桂榮. 固定化乳酸乳球菌連續(xù)生產(chǎn)Nisin的研究. 微生物學(xué)報(bào),2001, 41(5)：731-735.
　　10.孔健，顧笑梅, 馬桂榮. 乳酸乳球菌乳脂亞種W56中質(zhì)粒pJW566生物學(xué)特性研究. 微生物學(xué)報(bào), 41(6)：542-547.
　　11.孔健，鄭寶燦，馬桂榮. SL益生素對(duì)實(shí)驗(yàn)性高血脂癥的防治效果. 山東大學(xué)學(xué)報(bào),1998, 33(1)：106-109.
　　12.顧笑梅，孔健，馬桂榮等. 乳酸菌Z_(222)產(chǎn)胞外多糖(EPSⅠ)對(duì)免疫細(xì)胞功能的影響. 中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志,2003, 23(6)：442-445.
　　13.顧笑梅，孔健，王富生等. 一株乳酸菌所產(chǎn)胞外多糖對(duì)荷瘤小鼠機(jī)體免疫功能的影響。 微生物學(xué)寶，2003， 43（2）：251-256.
　　14.荊谷，孔健，孫磊等. 乳酸乳球菌L9產(chǎn)類細(xì)菌素lactococcin GJ-9發(fā)酵條件的研究,食品與發(fā)酵工業(yè),2003,(3):15-18.
　　15.王富生，任紅衛(wèi)，孔健. 乳酸菌青貯劑在秸稈黃貯中的作用.山東大學(xué)學(xué)報(bào), 2004, 39（2）：112-115.
　　16.王稚萱; 孔?。甃actobacillus brevis W5-17產(chǎn)生1,3-丙二醇的條件研究．食品與發(fā)酵工業(yè),2007,4:6-9.
　　
　　著作
　　1. 孔健主編，《農(nóng)業(yè)微生物技術(shù)》， 化工出版社，北京，2005。
　　2. 郭興華主編, 《益生乳酸細(xì)菌——分子生物學(xué)及生物技術(shù)》，孔健參編第二章“乳酸細(xì)菌的基因工程”，25-55頁(yè)，科學(xué)出版社，北京，2008。
　　3. 沈萍主編，《微生物學(xué)》（第2版），孔健參編第五章“微生物的代謝”，101-131頁(yè)，北京，高等教育出版社，2006.
　　4. 汪天虹主編，《微生物分子育種原理和技術(shù)》，參編部分節(jié)次，化工出版社，北京，2004。
　　
　　專利
　　1、綠色巴夫藻多不飽和脂肪酸延伸酶的核苷酸序列及其應(yīng)用，發(fā)明專利，申請(qǐng)?zhí)柣蚬_(kāi)號(hào)200710015216.5
　　2、一種快速克隆和鑒定細(xì)菌β-半乳糖苷酶基因的方法，發(fā)明專利，申請(qǐng)?zhí)柣蚬_(kāi)號(hào)200710014994.2

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