浙江農(nóng)林大學林木遺傳育種學、森林培育、野生動植物保護與利用專業(yè)碩士研究生入學考試

    植物細胞與基因工程考試大綱

    本《植物細胞與基因工程》考試大綱適用于浙江農(nóng)林大學林木遺傳育種學、遺傳學碩士學位的研究生入學考試。主要內(nèi)容包括植物基因工程和植物細胞工程兩大部分，要求考生能夠了解植物細胞與基因工程各研究領域中常用的技術手段，包括植物細胞與組織培養(yǎng)技術、細胞融合技術、基因工程的基本操作技術、PCR技術以及植物細胞與基因工程相結合的以基因轉移技術為核心的植物基因轉移技術等相關知識，并具有綜合運用所學知識分析問題和解決問題的能力。試卷滿分為100分，考試時間為120分鐘。

    考試內(nèi)容

    第一章緒論部分

    基本要求：要求學生大體了解基因工程的發(fā)展史、基因工程的研究內(nèi)容和基因工程的應用范圍。

    第一節(jié)：基因研究的發(fā)展歷史，基因工程的誕生

    簡要介紹基因研究發(fā)展理論上的三個重要發(fā)現(xiàn)，技術上的三個重要成果

    第二節(jié)：研究內(nèi)容：

    基因工程的概念，以及基因工程的研究內(nèi)容。

    第三節(jié)：基因工程的應用

    基因工程已在醫(yī)藥業(yè)、農(nóng)牧業(yè)、食品工業(yè)、環(huán)境保護、能源開發(fā)領域得到了廣泛的應用，本節(jié)著重介紹基因工程在這些方面的應用。

    重點：基因工程的研究內(nèi)容，以及基因工程的應用

    難點：基因工程的研究內(nèi)容，以及基因工程的應用

    第二章：基因工程的基本操作程序

    基本要求：要求學生掌握基因工程的五個方面基本操作程序，對基因工程有初步了解。

    第一節(jié)：帶有目的基因的DNA片段的制備

    介紹來自真核生物和原核生物的目的基因的DNA片段制備的方法（ｃDNA法，限制酶法，PCR方法，物理法以及人工合成法等）以及植物目的基因克隆的新策略。

    第二節(jié)：DNA片段與載體DNA體外重組

    使用某種方法將DNA分子進行剪切，然后進行兩種DNA分子的連接。

    第三節(jié)：DNA重組體轉入受體細胞

    利用化學法或電擊法將重組體導入大腸桿菌感受態(tài)細胞中。

    第四節(jié)：重組體克隆的篩選與鑒定

    重組體克隆的篩選與鑒定的方法較多，本節(jié)只介紹兩種常用的方法（表型直接篩選法和菌落或噬菌斑原位雜交。

    第五節(jié)：外源基因的表達

    外源基因的表達是基因操作過程的重要組成部分。成功的表達是基因工程操作的目的，外源基因在表達體系中，既能保持原來的生物活性又能高效地產(chǎn)生蛋白產(chǎn)物。

    重點：基因工程的基本操作程序

    難點：帶有目的基因的DNA片段的克隆以及外源基因的表達。

    第三章基因工程的工具酶

    基本要求：要求學生了解基因工程中工具酶的特點特性、以及應用

    第一節(jié)：基因工程工具酶的概念

    第二節(jié)：基因工程工具酶的分類，性質(zhì)

    根據(jù)工具酶的功能將工具酶分為三種不同的類型，剪切酶，修飾酶和連接酶，分別介紹其性質(zhì)。

    第三節(jié)：限制性核酸內(nèi)切酶的性質(zhì)及其應用

    限制性核酸內(nèi)切酶在基因工程的操作中使用的較多，所以該節(jié)重點介紹其性質(zhì)及其應用。

    第四節(jié)修飾酶

    聚合酶、堿性磷酸酶和甲基化酶

    第五節(jié)連接酶

    連接酶的種類、連接酶的反應條件、連接酶的影響因素

    重點：基因工程工具酶的限制性內(nèi)切酶II的特點和應用，修飾酶和連接酶的特點和應用

    難點：基因工程工具酶的性質(zhì)和在基因工程中的應用

    第四章基因工程載體

    基本要求：要求學生了解和掌握基因工程載體的要求，特性，以及如何選擇基因工程的載體。

    第一節(jié)：基因工程載體的概念及其分類，

    簡要介紹基因工程所用載體的概念，以及分類情況，如質(zhì)粒載體、噬菌體載體等。

    第二節(jié)：各種不同的基因工程載體的特性及其應用

    針對不同的基因工程載體進行分別講解，將載體的特性，及其在基因工程中的應用一一介紹。

    重點：基因各種不同的基因工程載體的特性

    難點：如何選擇基因工程的載體

    第五章聚合酶鏈式反應(PCR)

    基本要求：要求學生了解和掌握PCR相關技術以及應用。

    第一節(jié)：PCR的原理

    第二節(jié)：PCR的種類

    根據(jù)不同的目的，對PCR進行分類，

    第三節(jié)：應用PCR時的注意事項

    第四節(jié)：PCR在各個領域的應用

    現(xiàn)你分子生物學發(fā)展很快，PCR的應用范圍很廣泛，如醫(yī)學界、法醫(yī)、農(nóng)作物的應用以及植物的育種方面等。

    重點：PCR的原理和種類

    難點：PCR應用時應注意的事項以及如何應用PCR

    第六章分子標記技術

    基本要求：要求學生掌握分子標記技術的相關原理和應用

    第一節(jié)：分子標記的基本原理

    第二節(jié)：分子標記的類型

    第三節(jié)：新型分子標記的開發(fā)和應用

    第四節(jié)：分子標記的應用

    重點：分子標記的開發(fā)和應用

    難點：選擇分子標記應注意的事項

    第七章植物基因工程

    基本要求：要求學生了解和掌握植物基因轉化的方法以及植物基因工程的應用和發(fā)展

    第一節(jié)根瘤農(nóng)桿菌及其轉化體系

    系統(tǒng)介紹根瘤農(nóng)桿菌及其轉化體系。

    第二節(jié)　基因的導入方法

    介紹基因轉化的各種不同的方法如基因槍轉化，農(nóng)桿菌介導的基因轉化，

    第三節(jié)　轉基因植物的鑒定

    表型鑒定，分子鑒定和蛋白質(zhì)鑒定。

    第四節(jié)　植物基因工程的應用與展望

    重點：植物基因?qū)氲姆椒ê娃D基因植物的鑒定方法

    難點：根癌農(nóng)桿菌及其轉化體系的特點和性質(zhì)

    第八章細胞融合技術

    基本要求：了解細胞融合的基本原理和融合材料的制備，細胞融合技術，單克隆抗體的生產(chǎn)以及新物種的培育。

    第一節(jié)細胞融合的基本原理和融合材料的制備。

    第二節(jié)細胞融合技術及影響因素。

    第三節(jié)融合細胞的選擇。

    第四節(jié)單克隆抗體的生產(chǎn)以及新物種的培育。

    第五節(jié)細胞融合技術的進展與展望。

    重點：細胞融合技術，單克隆抗體的生產(chǎn)以及新物種的培育。

    難點：細胞融合技術的進展與展望。

    第九章植物細胞培養(yǎng)技術

    基本要求：了解植物組織與細胞培養(yǎng)的區(qū)別與發(fā)展歷程；植物細胞培養(yǎng)，包括方法、應用、生物反應器培養(yǎng)、固定化培養(yǎng)以及存在的問題等，并從列舉的植物中了解植物細胞培養(yǎng)技術在實際的應用。

    第一節(jié)簡介植物組織與細胞培養(yǎng)的區(qū)別與發(fā)展歷程。

    第二節(jié)植物細胞培養(yǎng)，包括方法、應用、生物反應器培養(yǎng)、固定化培養(yǎng)以及存在的問題等

    第三節(jié)植物單細胞培養(yǎng)，包括單細胞的制備、單細胞培養(yǎng)方法、植物細胞大規(guī)模懸浮培養(yǎng)、。

    第四節(jié)應用舉例，列舉商品化的細胞大規(guī)模培養(yǎng)的植物的研究

    重點：植物細胞培養(yǎng)技術，包括方法、應用、生物反應器培養(yǎng)、固定化培養(yǎng)以及存在的問題等。包括原生質(zhì)體的制備、培養(yǎng)、發(fā)育和植株再生等。

    難點：植物單細胞制備、培養(yǎng)、發(fā)育和植株再生等。

    參考書（書名，編著者，出版社，出版時間,自編教材需有文字材料）

    《基因工程原理與應用》陳宏主編中國農(nóng)業(yè)出版社2004

    《植物細胞工程原理與技術》周維燕主編，中國農(nóng)業(yè)出版社，

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